恒溫恒濕培養(yǎng)箱怎么測定水中土壤菌群

　　恒溫恒濕培養(yǎng)箱怎么測定水中土壤菌群
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　　1、測定過程
　　1.1水樣的收集
　　1.2用無菌采樣瓶收集被測樣品，在采樣過程中，要維護(hù)瓶口和瓶頸，避免這些部分受雜菌污染。瓶內(nèi)要留下足夠的空間，以備測定之前搖晃。
　　1.3若收集的水中有余氯，應(yīng)于采樣前在無菌操作下于無菌采樣瓶中加人滅過菌的硫代硫酸鈉，加人量為每升水樣約0.1g。
　　1.4水樣收集后應(yīng)立即進(jìn)行測定，如果2h內(nèi)不能進(jìn)行測定，應(yīng)把水樣放在冰箱中，于4℃~10℃保存，保存時刻不宜超越24h。經(jīng)冷凍保存后的水樣需測守時，從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h，再進(jìn)行測定。
　　1.5無菌箱(室)滅菌，把試驗所用的無菌稀釋水、無菌培育皿、無菌吸管等用品放人無菌箱(室)內(nèi)，打開紫外線燈滅菌30min。
　　1.6水樣的稀釋和接種，關(guān)掉紫外線燈，打開熒光燈，將待測水樣放人無菌箱(室)中，立即用75%的乙醇溶液浸泡的醫(yī)用脫脂棉球擦手，點(diǎn)著無菌箱(室)內(nèi)的酒精燈。
　　以下對水樣的稀釋和接種條的操作應(yīng)在無菌箱(室)內(nèi)的火焰區(qū)進(jìn)行。
　　1.7選擇適合的稀釋度，應(yīng)使最后一個稀釋度接種后培育皿中生長的菌落數(shù)小于300個，在空白稀釋水樣瓶上標(biāo)上稀釋度數(shù)。
　　1.8用10倍稀釋法稀釋水樣，即用5mL無菌吸管汲取5mL水樣注入到45mL空白稀釋水中充沛搖勻，此刻稀釋度為10-1.
　　1.9另取一支5mL無菌吸管汲取5mL10-1水樣移人到第二個稀釋水中，充沛搖勻，此刻稀釋度為10~2，順次類推，直至需求的稀釋度為止。
　　1.10將不同稀釋度的水樣分別接種到無菌培育皿中，每個稀釋度重復(fù)接種3~5個皿，每皿接種1mL，接種時左手掌托住培育皿，大拇指和食指輕輕將培育皿提起，吸管與培育皿底成45°角相接。移開吸管時吸管不宜再碰到培育皿。接種時刻不宜超越4s。每接種一個稀釋度更換一支無菌吸管。另取一組培育皿不接水樣，作為空白。同時操作。
　　1.11將滅過菌的培育基冷卻至(45士1)℃，掀開培育皿蓋，將培育基灌入培育皿內(nèi)，每皿應(yīng)灌15mL~20mL。灌皿時不要使培育基直接灌在水樣上，灌皿后要將融化的培育基和皿中水樣*混合， 小心勿使混合液濺到培育皿的邊際， 測定一個水樣從接種到灌皿不得超越20min。
　　2、培育
　　待培育皿中培育基固化后，倒置平皿，在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中29℃培育72h。