冷凍離心機(jī)的梯度介質(zhì)有如下特點(diǎn): 1、梯度介質(zhì)應(yīng)該是惰性的,至少對(duì)被分離顆粒沒(méi)有毒性。
2、應(yīng)知道梯度介質(zhì)的理化特性,能夠利用這些特性中的一種或多種特性(如折射率)測(cè)定梯度介質(zhì)的濃度。
3、梯度介質(zhì)要能夠把懸浮液中的顆粒定量的分離出來(lái),即要求用它所配置的梯度柱要有確定的密度范圍。
4、在給定的密度范圍內(nèi),梯度介質(zhì)對(duì)滲透壓敏感的顆粒應(yīng)該是等滲的。
5、梯度介質(zhì)應(yīng)能調(diào)到與被分離顆粒生理狀態(tài)一致的PH值和離子強(qiáng)度,并且不管介質(zhì)濃度如何變化,PH值和離子強(qiáng)度都保持不變,也不會(huì)發(fā)生水合作用。
6、在給定的密度范圍內(nèi),梯度介質(zhì)的粘度應(yīng)盡可能低。
7、梯度介質(zhì)不會(huì)干擾分級(jí)分離時(shí)樣品區(qū)帶的監(jiān)測(cè)。
8、梯度介質(zhì)應(yīng)該很方便的從分離的顆粒中除去,并且不損失樣品的活性。
9、能夠消毒,并且分離特性不變,不腐蝕所用的離心管、轉(zhuǎn)子和各種量器。
10、所用的梯度材料應(yīng)該是純的物質(zhì),價(jià)格便宜,貴重材料使用后便于回收再利用。
知道冷凍離心機(jī)梯度介質(zhì)特點(diǎn)了,我們?cè)賮?lái)了解下離心機(jī)梯度介質(zhì)的回收,它的回收大致有3種方式:有頂部收集法、底部收集法以及切割法等。
一、頂部收集法:
不破壞離心管。
頂部收集取代法:
1、向上取代法:注入高密度液體。
2、向下取代法:注入低密度液體。
3、虹吸法:靠負(fù)壓依次吸取梯度介質(zhì)。
二、底部收集法:
用一根金屬空心針從離心管底刺人管內(nèi),不同區(qū)帶內(nèi)的組分自下而上先后從針管內(nèi)分別流出,然后用收集器分別收集。
三、切割法:
粘度大時(shí)上述方法不適用。
1、凍結(jié)切割法。
2、聚合切割法。